（实验八）叶绿体中色素的提取和分离

 

 

 实验原理
      叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
      石油醚是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度是不同的：溶解度最高的是胡萝卜素，它随石油醚在滤纸上扩散得最快，叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散得最慢。这样，四种色素就在扩散过程中分离开来。
      目的要求
      1．学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
      2．1家叶绿体中的四种色素。
      材料用具
      新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）。
      干燥的定性滤纸，烧杯（ 100    mL），研体，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量简（10 InL），天平。
      丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
      方法步骤
      1．提取绿色叶片中的色素
     （1）称取5只绿色的叶片，剪碎，放入研钵中。
    （2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入 3  mL丙酮，进行迅速充分的研磨。
    （3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管目塞紧。
      2．制备滤纸条
      取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长  10 cm、宽  1cm的滤纸条，在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。
    3．画滤液细线、
      用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液于后，再画2~3次。
      4．分离叶绿体中的色素
    将3 mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微料靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧体；注意，不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。
      5．观察实验结果
    看到四种色素的颜色后，取出滤纸条，观察滤纸条上的色素带颜色、位置、宽窄，并且填写实验报告。
     
      讨论
1. 提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？
2. 为什么不能让滤纸上的滤液细线触到层析液？
3．为什么实验结束后一定要用肥皂将手洗净？
由于接触了丙酮、苯等化学药品。
4. 叶绿体中有哪几种色素？滤纸条上的色素带，从上到下是怎样排列的？
5. 叶绿体中的色素含量最多和扩散速度最快的是哪一种？

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